兔白细胞介素17A（IL-17A）ELISA检测试剂盒使用手册 

                                                                       产品货号：XZK-12500

【摘要】：白介素-17家族。该家族的细胞因子被分别命名为白介素-17A到白介素-17F。人们还找到了它们的受体家族：白介素-17受体A到白介素-17受体E。这些白介素-17细胞因子可以结合到相对应的受体成员上从而介导不同的炎症反应。白细胞介素-1 7(IL-17)功能：IL-17A具有强大的致炎性：① 它能促进机体局部产生趋化因子，如IL-8、MCP-1(单核细胞趋化蛋白-1)、Gro-a (生长调节因子-a)，因此有助于单核细胞和中性粒细胞的迅 速增多。② 能刺激产生IL-6和PGE-2，增强局部炎症。此外，IL-17A可刺激产生造血细胞因子G-CSF和GM-CSF，引起骨髓细胞系的增生；③ 还能诱导细胞表面的细胞间粘 附分子(intercellular adhesion molecule，ICAM )，驱动T细胞的应答。

【产品用途】：本试剂盒仅供科研使用，定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本中IL-17A含量。凡订购我司任意一款试剂盒均享受免费代测服务，欢迎咨询、订购！

检测原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被白细胞介素17A（IL-17A）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素17A（IL-17A）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

兔白细胞介素17A（IL-17A）ELISA检测试剂盒组成：（检测范围请以新版说明书为准）

注意：使用前请检查试剂盒中试剂的标签和数量与表格是否一致。 

样本处理及要求：

【血清】：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

【血浆】：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

【组织匀浆】：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

【细胞培养物上清】：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

【其它生物标本】：1000×g离心20分钟，取上清即可检测。

【样品外观】：样品应清澈透明，悬浮物应离心去除。

【样品保存】：样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃（1个月内检测），或-80℃（6个月内检测），避免反复冻融，标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

安全性：

1． 避免人体直接接触显色剂A、B和终止液。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要进食、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

保存条件及有效期：

1.试剂盒保存：2-8℃

2.有效期：6个月