兔C肽（C-P）ELISA检测试剂盒使用手册 

                                                                       产品货号：XZK-12438

【摘要】：C肽（C-Peptide）又称连接肽，由胰岛β细胞分泌，它与胰岛素有一个共同的前体胰岛素原。胰岛素原裂解成1个分子的胰岛素和1个分子的C肽，因此C肽与自身胰岛素摩尔量是一致的。因为C肽不容易被肝脏降解，因此测C肽就是测了胰岛素的含量，能准确反映胰岛细胞的功能。在口服葡萄糖耐量试验的同时可抽血测定空腹血糖负荷后1小时、2小时、3小时的血清C肽水平，正常人在服糖60分钟后C肽水平升高至基础水平的3倍以上。1型糖尿病C肽水平极低，胰岛功能减退者餐后C肽上升的幅度常低于3倍。对于接受胰岛素治疗的患者，用测定血中胰岛素水平不能评价自身胰岛功能，可以测定C肽水平来评价自身胰岛β细胞功能。

【产品用途】：本试剂盒仅供科研使用，定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本中C-P含量。凡订购我司任意一款试剂盒均享受免费代测服务，欢迎咨询、订购！

实验前准备要点：

1. 准备各种实验仪器及材料（如：37℃恒温箱，450nm酶标仪、高速离心机、高精度加样器及枪头等等）

2. 按照生物实验室安全防护条例，穿着实验服并佩戴乳胶手套做好防护工作

3. 使用前应将试剂盒内各试剂取出，平衡至室温（至少30分钟）

4. 严格按照说明书的操作方法进行操作。说明书以英文说明书为准。

兔C肽（C-P）ELISA检测试剂盒组成：（检测范围请以新版说明书为准）

注意：使用前请检查试剂盒中试剂的标签和数量与表格是否一致。 

操作步骤：

【平衡试剂盒至常温】：取出实验过程中所需板条，剩余半条用自封袋密封放回4摄氏度。

【加样】：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。在样本孔先加样本10μl再加稀释液40μl，（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
【加酶】：标准品孔和样本孔总每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL空白孔除外。
【温育】：用封板膜封住反应孔，37℃恒温箱温育60分钟。
【配液】：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
【洗涤】：小心揭掉封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置60秒后甩去洗涤液，吸水纸上拍干。如此重复5次（也可用洗板机洗板）。

【显色】：每孔先加入底物溶液A 50μl，再加入底物溶液B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光孵育15分钟。
【终止】：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
【测定】：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

【说明】：电子版说明书仅供参考，实际操作请按照随产品发送的印刷版说明书。中英文说明书可能会有不一致的地方请以英文说明书为准。

安全性：

1． 避免人体直接接触显色剂A、B和终止液。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要进食、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

保存条件及有效期：

1.试剂盒保存：2-8℃

2.有效期：6个月