人黄热病毒IgG（YFV-IgG）ELISA检测试剂盒使用手册 

                                                                       产品货号：XZK-R239

检测原理：试剂盒采用一步间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被抗原的包被微孔中，依次加入标本、HRP标记的检测抗抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中黄热病毒IgG（YFV-IgG）的存在与否。

试剂盒性能：

准确性：阳性对照孔OD值平均值≥1.00；阴性对照孔OD值平均值≤0.15，说明试验结果有效。

特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

【储存条件及有效期】：

 1、2-8℃保存，切勿冷冻，有效期 6 个月。 

2、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自 封袋，并将全部试剂放回 2-8℃冰箱。 

注意：试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用 后的剩余试剂盒建议在首次实验后 1 个月内使用完毕。产品过期 时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。

 需要但未提供的材料及耗材：

1、酶标仪（建议仪器使用前提前预热） 

2、精密移液器、吸头、加样槽 

3、蒸馏水或去离子水 

4、洗瓶或者自动洗板机 

5、37℃水浴锅或恒温箱 

6、EP 管 

7、无粉一次性乳胶手套 

人黄热病毒IgG（YFV-IgG）ELISA检测试剂盒组成：

操作步骤：

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置阴、阳性对照孔和样本孔，阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL；

3.  待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；

4.  随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗原100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。