兔瘦素（LEP）ELISA检测试剂盒使用手册 

                                                                       产品货号：XZK-12838

【摘要】：瘦素（Leptin）是一种由脂肪组织分泌的激素，它在血清中的含量与动物脂肪组织大小成正比 。瘦素作用于位于中枢神经系统的受体（Leptin Receptor） 从而调控生物的行为以及新陈代谢。当动物体的体脂减少或处于低能量的状态下（例如饥饿），血清中瘦素的含量会明显下降， 从而激发动物的觅食行为， 同时降低自身能量消耗。反之，当生物体的体脂增加时，血清中瘦素含量升高，进而抑制进食并且加速新陈代谢。瘦素就是通过这样的负反馈机制来调控生物体的能量平衡以及体重。

【产品用途】：本试剂盒仅供科研使用，定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本中LEP含量。凡订购我司任意一款试剂盒均享受免费代测服务，欢迎咨询、订购！

实验前准备要点：

1. 准备各种实验仪器及材料（如：37℃恒温箱，450nm酶标仪、高速离心机、高精度加样器及枪头等等）

2. 按照生物实验室安全防护条例，穿着实验服并佩戴乳胶手套做好防护工作

3. 使用前应将试剂盒内各试剂取出，平衡至室温（至少30分钟）

4. 严格按照说明书的操作方法进行操作。说明书以英文说明书为准。

兔瘦素（LEP）ELISA检测试剂盒组成：（检测范围请以新版说明书为准）

注意：使用前请检查试剂盒中试剂的标签和数量与表格是否一致。 

操作步骤：

【平衡试剂盒至常温】：取出实验过程中所需板条，剩余半条用自封袋密封放回4摄氏度。

【加样】：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。在样本孔先加样本10μl再加稀释液40μl，（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
【加酶】：标准品孔和样本孔总每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL空白孔除外。
【温育】：用封板膜封住反应孔，37℃恒温箱温育60分钟。
【配液】：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
【洗涤】：小心揭掉封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置60秒后甩去洗涤液，吸水纸上拍干。如此重复5次（也可用洗板机洗板）。

【显色】：每孔先加入底物溶液A 50μl，再加入底物溶液B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光孵育15分钟。
【终止】：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
【测定】：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

【说明】：电子版说明书仅供参考，实际操作请按照随产品发送的印刷版说明书。中英文说明书可能会有不一致的地方请以英文说明书为准。

安全性：

1． 避免人体直接接触显色剂A、B和终止液。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2． 实验中不要进食、抽烟或使用化妆品。

3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

保存条件及有效期：

1.试剂盒保存：2-8℃

2.有效期：6个月